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如何清潔或再生色譜柱？

背壓增加、保留時間變化和柱性能損失都是色譜柱入口篩板、色譜柱或固定相表面沉積物的常見癥狀。大多數(shù)情況下，這些問題可以通過使用正確的洗滌程序來克服。越早使用色譜柱再生程序，您就越有可能恢復(fù)色譜柱的原始性能。在色譜柱的溶劑入口端收集強吸附物質(zhì)，在許多情況下，洗滌過程中使用反向流動是有益的。與人們普遍認為的相反，逆流永遠不會損害填料良好的色譜柱。提到的流動方向通常是色譜柱最初填充的方向。請注意，不規(guī)則/無定形原始二氧化硅在逆流時可能會出現(xiàn)問題，因為可能會重新構(gòu)造填充床。當(dāng)在這些不規(guī)...

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如何處理背壓增加的問題

當(dāng)進行液相色譜實驗時，遇到背壓增加的問題是非常常見的。這種問題通常會影響您的分析結(jié)果，因此需要及時的處理。下面介紹一些處理背壓增加問題的方法。1.檢查保護柱和分析柱背壓增加通常表明保護柱或分析柱有問題。您可以首先卸下保護柱（如果您正在使用保護柱）并用新柱更換舊柱。如果恢復(fù)到原來的壓力，問題就解決了。如果壓力仍然很高，可以通過斷開分析柱與系統(tǒng)的連接，對其進行反沖洗（進行此操作時不要將柱連接到檢測器），并通過柱運行幾個柱體積的流動相。2.柱的再生如果問題仍然存在，您的色譜柱中可能...

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實用方法：解決HPLC分析中出現(xiàn)無峰、小峰或負峰問題

在HPLC分析中，出現(xiàn)無峰、小峰或負峰是常見的問題。這些問題通常是由于實驗條件的不當(dāng)、樣品制備方式不當(dāng)、儀器使用問題、列柱相關(guān)問題等原因所引起的。針對此類問題，應(yīng)該優(yōu)先考慮解決以下幾點:檢查檢測器燈是否亮起。有時候，不能檢測到某些組分是因為檢測器未開啟或者沒有正確安裝。檢查泵和積分器之間的連接是否松散或斷線。如果連接不緊密可能會導(dǎo)致流量變小或者樣品流動不均勻，進而導(dǎo)致無峰、小峰等問題。檢查泵是否打開，流向是否正確。通常，泵應(yīng)該流向色譜柱而不是廢液。如果泵流向錯誤，可能會導(dǎo)致無...

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過濾頭生銹對HPLC分析的影響及解決方法

當(dāng)溶劑中的過濾頭生銹時，銹可以被認為是一種顆粒物污染，這種污染會影響HPLC分析結(jié)果，導(dǎo)致拖尾、柱壓上升等現(xiàn)象。除此之外，溶解在溶劑中的金屬離子可以通過色譜柱被沖出而不在柱子中保留，因此對固定相或硅膠基質(zhì)不會產(chǎn)生反應(yīng)。雖然金屬離子不會和柱子發(fā)生反應(yīng)，但它們也會對HPLC分析產(chǎn)生負面影響，如下所示：1.降低柱子壽命雖然金屬離子對柱子材料的化學(xué)性質(zhì)沒有直接影響，但它們可能對流動相產(chǎn)生一定的化學(xué)反應(yīng)，可能會導(dǎo)致柱子磨損和老化。這些反應(yīng)可能會導(dǎo)致柱子失去分離能力和分辨率。2.影響色譜...

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HPLC中基線漂移或噪聲的原因及解決方法

HPLC(高效液相色譜)是一種重要的分離技術(shù)，但很多時候會面臨基線漂移或噪聲的問題，這對于結(jié)果的準確性和穩(wěn)定性都會產(chǎn)生影響。那么這些問題的原因是什么呢？接下來我們將逐一分析，并提供相應(yīng)的解決方法。造成基線漂移或噪聲的原因：1.柱子老化HPLC柱子是一個重要的組成部分，如果柱子使用時間太長，會出現(xiàn)老化現(xiàn)象。柱子老化導(dǎo)致了柱子內(nèi)部結(jié)構(gòu)的改變，從而可能會改變樣品的流動性和柱子的保留能力。2.溶液成分的不穩(wěn)定性有些溶液的成分可能不夠穩(wěn)定，比如溶解劑、水等，甚至是樣品本身的穩(wěn)定性也不夠...

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